摘要：目的 为了解的流行和感染情况，并进行快速准确的检测。方法本研究建立了含非竞争性内标的同时检测肠道病毒通用型、肠道病毒EV71型及柯萨奇病毒CA16型的四重荧光RT-PCR方法,对该方法的特异性、灵敏度等进行评价，并对多份临床样本进行了应用检测。结果实验结果表明，该检测方法特异性强，对肠道病毒及其他人类非肠道病毒进行了检测，显示了良好的特异性；该检测方法对EV71型和CA16型的检测灵敏度分别达到31.25TCID50和1.25×102 TCID50；将浓度为1×104 TCID50及5×102TCID50的EV71样本进行重复性实验，其变异系数均小于1.5%；将浓度为5×102~5×105TCID50的EV71和CA16样本进行定量范围实验，其相关系数R2值在0.982~0.998之间。采用本研究建立的方法检测40份疑似临床样本，最后检出31份肠道病毒阳性样本，检出率为77.5%，其中8例为EV71型阳性，13例为CA16型阳性。另外，实验数据表明内标对监控PCR抑制物的存在具有重要作用。结论本方法能同时快速检测所有肠道病毒并进行EV71型及CA16型的分型，并且灵敏度高、特异性好、扩增效率高，由于加入了内标，能有效地监控假阴性的出现，适合于的临床检测。

　　 关键词：四重荧光RT-PCR；非竞争性内标；；肠道病毒；检测